5. ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN BẢO QUẢN ĐẾN CHẤT LƯỢNG DNA TRÊN MẪU MÁU THẤM KHÔ
Main Article Content
Abstract
Mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng của thời gian và nhiệt độ bảo quản đến chất lượng DNA tách chiết từ mẫu máu thấm khô (DBS).
Đối tượng và phương pháp: Máu ngoại vi của một tình nguyện viên khỏe mạnh được nhỏ lên giấy thấm chuyên dụng, bảo quản ở ba điều kiện nhiệt độ (25°C, 2–8°C và –20°C) trong 1 tuần, 1 tháng và 3 tháng. DNA được tách chiết bằng bộ kit G-spin™ Total DNA Extraction Mini Kit. Chất lượng DNA được đánh giá bằng đo quang phổ (OD260/280), điện di agarose và PCR khuếch đại đoạn exon 6 trên gen CACT (233 bp).
Kết quả: DNA tách trong vòng 24h có nồng độ trung bình 32,7 ng/µl, độ tinh sạch 1,81. Sau 1 tuần và 1 tháng, nồng độ giảm còn 19,6 ng/µl và 18,1 ng/µl; sau 3 tháng giảm rõ rệt còn 7,2 ng/µl. Trong các điều kiện bảo quản, mẫu ở 25°C cho nồng độ DNA trung bình cao nhất (19,3 ng/µl), tiếp theo là –20°C (14,5 ng/µl), thấp nhất ở 2–8°C (11,1 ng/µl).
Kết luận: Chất lượng DNA tách từ mẫu máu khô có xu hướng giảm theo thời gian những vẫn đảm bảo chất lượng cho PCR.
Article Details
Keywords
tách DNA từ mẫu máu thấm khô, bảo quản mẫu máu thấm khô, PCR.
References
[2] Trần Vân Khánh. Bài giảng Y sinh học phân tử, NXB Y học, 2023.
[3] Barsa B., Nitika P., Rupenangshu K.H. (2019). Comparative analysis of three methods from dried blood spots for expeditious DNA extraction from mosquitoes; suitable for PCR based techniques, Molecular Biology Reports, 151-160.
[4] Alanna S., Amrish B., Philip J. et al (2015). The Effect of Storage and Extraction Methods on Amplification of Plasmodium falciparum DNA from Dried Blood Spots, Am J Trop Med Hyg, 92(5), 922-5.
[5] Choi, E.H., Lee S.K., Ihm C. et al. (2014). Rapid DNA extraction from dried blood spots on filter paper: potential applications in biobanking, Osong Public Health Res Perspect, 5(6), 351-7.