Bài báo khoa học Tập 66 Số CĐ23-NCKH 11/12/2025

THIẾT LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ TÍNH PHÙ HỢP QUY TRÌNH NHẬN DẠNG VIRUS ROTA SỬ DỤNG BỘ SINH PHẨM QIAGEN ONE-STEP RT-PCR

Đặng Thị Ngân Hà1, Nguyễn Đăng Hiền1, Trần Thị Bích Hạnh1, Nguyễn Thúy Hường1
1 Trung tâm Nghiên cứu, Sản xuất Vắc-xin và Sinh phẩm y tế
DOI: 10.52163/yhc.v66iCD23.3926
20 Lượt xem
9 Lượt tải xuống
Tóm tắt

Trung tâm Nghiên cứu, Sản xuất Vắc-xin và Sinh phẩm y tế (POLYVAC) hiện nay đang sử dụng phương pháp RT-PCR để thực hiện thử nghiệm nhận dạng vắc-xin Rota bán thành phẩm và thành phẩm chủng G1P[8]. Với phương pháp này, sản phẩm sau khi tách chiết sẽ được chạy PCR 2 lần, chu trình RT-PCR cần khoảng 8 giờ để nhận dạng typ G1 và tương tự cần 8 giờ để nhận dạng typ P[8]. Tổng thời gian thực hiện thử nghiệm từ khi tách chiết đến chạy điện di đọc kết quả mất khoảng 3 ngày.

Bằng việc sử dụng bộ kit QIAGEN OneStep RT-PCR, chúng tôi đã rút ngắn được tổng thời gian thử nghiệm xuống còn 1,5 ngày do chỉ cần chạy PCR 1 lần duy nhất vừa phiên mã ngược, vừa nhân bản sản phẩm phiên mã trong cùng 1 chu trình phản ứng, tổng thời gian mất khoảng 3 giờ cho chu trình PCR để nhận dạng typ G1 và typ P[8]. Kết quả nghiên cứu đã thiết lập được quy trình thử nghiệm nhận dạng virus Rota sử dụng bộ kit QIAGEN OneStep RT-PCR (100) phù hợp với yêu cầu của thử nghiệm và có kết quả tương đồng với thử nghiệm nhận dạng hiện đang áp dụng tại POLYVAC.

Tài liệu tham khảo
[1]
Đặng Đức Anh. Virus Rota: dịch tễ, miễn dịch và vắc-xin. Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, 2010. Google Scholar
[2]
Nguyễn Văn Mẫn, Lê Thị Luân, Nguyễn Thúy Hường, Nguyễn Thị Quỳ. Giám sát dịch tễ học căn bệnh tiêu chảy do virus Rota tại Việt Nam từ 8/1998 đến tháng 12/2002. Tạp chí Y học thực hành, 2003, (469): 33-35. Google Scholar
[3]
Nguyễn Thúy Hường, Nguyễn Phương Thảo, Trần Thị Bích Hạnh, Nguyễn Đăng Hiền. Nghiên cứu tính ổn định của vắc-xin Rotavin công thức cải tiến sản xuất tại Việt Nam. Tạp chí Y học dự phòng, 2020, 30 (7): 18-25. Google Scholar
[4]
Phạm Thị Phương Thảo. Nghiên cứu, đánh giá các chủng virus Rota lưu hành tại Việt Nam từ năm 1998 đến nay. Luận văn thạc sĩ y học, Trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, 2010. Google Scholar
[5]
Quick-Start Protocol QIAGEN OneStep RT-PCR Kit. Google Scholar
[6]
World Health Organization. Guidelines to assure the quality, safety and efficacy of live attenuated rotavirus vaccines (oral). WHO Technical Report Series, 2007, No. 941, annex3, 2007. Google Scholar
[7]
World Health Organization. Thermostability of Vaccines. Global programme for vaccines and immunization. GPV /98.07, 1998. Google Scholar
[8]
World Health Organization. Rotavirus vaccines, 2013, 88 (5): 49-64. Google Scholar
[9]
World Health Organization. Manual of Rotavirus detection and characterization, methods, 2009, 47-99. Google Scholar